NanoFilt vs Filtlong谁更胜一筹?
三代测序(尤其是 Nanopore)数据中普遍存在读长分布广、质量波动大等问题,质控作为下游比对和组装的前置步骤,其重要性不言而喻。本文聚焦两款高频使用的三代测序质控工具:NanoFilt 与 Filtlong,对比其原理、参数设置与实际表现,为你筛选最优方案。
使用C++开发,效率更高
核心理念是打分排序 + 截留最优子集
可结合参考序列选择对参考更接近的 reads
🌟为什么要设置 --headcrop / --tailcrop?
因为三代测序因信号捕获机制,首尾碱基常存在质量劣化或接头残留,容易误导下游分析。合理裁剪首尾可有效提升 reads 整体质量,降低比对错误率。
--min_length:最小保留长度
--keep_percent:保留打分靠前的 top n%
--target_bases:保留指定总碱基量(适合抽样)
--mean_q_weight:调整评分时对质量的权重
--ref:提供参考序列,根据比对得分筛选 reads(偏好真实信号)
Nanofilt更侧重高效质量过滤,操作简洁且裁剪功能灵活多样;
Filtlong更适合按目标碱基量筛选优质reads,支持基于参考的辅助优化;
若目标是精简且高质量子集,Filtlong 优势明显;反之若注重整体数据质量均衡,NanoFilt 更为便捷。
推荐使用 gunzip -c 解压 .gz 文件,避免 zcat 在某些系统上的兼容性问
NanoFilt 支持直接嵌入管道(| minimap2 | samtools)执行效率高
Filtlong 输出需显式控制格式,建议独立执行并输出到文件
可搭配 NanoStat 或 Filtlong --split 1 等方式评估质控效果
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