实验秘籍 | 瑞孚迪「Alpha技术」：谁能拒绝又简单又精确的检测方法啊！

● Alpha技术是一种快速、高灵敏、均相、免洗、可在微孔板中进行检测的技术平台。Alpha实验需要供体微珠与受体微珠与靶点进行结合。在680nm光源的激发下，供体微珠产生的是单态氧，其在溶液中能够扩散大约200nm的距离。如果受体微珠距离供体微珠足够接近，便能够接收到单线态氧。单线态氧激发受体微珠表面的化学物质，引发一系列化学发光级联反应，从而发射出特定波长的光信号，反之便不会有信号产生。如图1，我们会将供体微珠与受体微珠各自与其中一种抗原蛋白相结合。当在检测体系中存在可以同时结合这两种抗原蛋白的双抗时，便能够将这两种抗原蛋白聚集到一起，并在激发下形成能量共振转移。

● 因此相对于HTRF，Alpha技术能够运用在一些更为复杂构象的蛋白互作检测中，并能够很好地耐受机制带来的影响。而将此技术运用在双抗上时，整个检测的模型也与HTRF类似。

● 相较于标准 ELISA，AlphaLlSA® 技术拥有更宽的动态范围和更高的灵敏度，而且检测步骤更少、流程更简单。

● 除此以外，Alpha还可以提供一种能够在单个检测孔中同时检测双抗与两个抗原蛋白各自的结合特性的检测方法，便是AlphaPlex检测技术。

● 此方法是建立在Alpha技术的基础上，通过使用两种Alpha受体微珠（发射545nm、645nm信号的AlphaPlex微珠与发射615nm信号的AlphaLISA微珠），从而达到在单孔中同时检测两个蛋白的目的。在双抗检测的运用上，具体的模型如图2。其中两个抗原蛋白分别用两种Alpha受体微珠进行捕获，而双抗自己则在与两个抗原蛋白互作的基础上再通过Alpha供体微珠进行识别，从而形成可以同时检测双抗两个抗原结合位点的结构。而此方法的优化也与先前的方法类似，只需确定合适的材料并进行抗原蛋白的浓度优化，便能快速完成方法的建立。

1️⃣全能：几乎可以测量任何目标；

2️⃣易于使用：均相检测，无需洗涤或分离步骤；

3️⃣快速：耗时不到标准ELISA实验的一半；

4️⃣高灵敏度：可检测低至飞克级分析物水平；

5️⃣较大的动态范围：4~5logs。

生物标志物检测

表观遗传学

蛋白激酶

蛋白-蛋白相互作用

GPCRs

细胞因子

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